关于人胎盘生长因子(PLGF)检测试剂盒实验的问题解答

　　

　　人胎盘生长因子(PLGF)elisa试剂盒是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（elisa）。往预先包被人胎盘生长因子(PLGF)捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的人胎盘生长因子(PLGF)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

　　

　　人胎盘生长因子(PLGF)检测试剂盒实验中遇到的问题解答

　　

　　一、洗板

　　

　　也许因素：

　　

　　1)选用手艺洗板，孔与孔之间液体穿插。

　　

　　2)选用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，致使洗板不*；洗板针阻塞，抽吸不*；洗板不畅，致使洗板作用差。

　　

　　3)反响板过多形成洗板等待时刻长。

　　

　　解决办法：

　　

　　1)确保洗液注满各孔，洗板针疏通，洗完板后在吸水纸（挑选洁净、无或少尘的吸水资料）上轻轻拍干；

　　

　　2)合理安排，或多用几台洗板机。

　　

　　二、显色

　　

　　ELISA试剂盒也许因素：

　　

　　1)显色剂制造后放置时刻过长或运用过期显色剂；

　　

　　2)加显色剂时溅起孔外形成液体回流。

　　

　　解决办法：

　　

　　1)显色剂尽量在临用前制造，坚持不必过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不必；

　　

　　2)加样时坚持显色剂不外流；

　　

　　3)A、B液应防止触摸金属器械。

　　

　　三、停止

　　

　　也许因素如加停止液时发生较多气泡，致使假阳性添加。所以在加停止液时应防止发生气泡。

　　

　　四、读板

　　

　　ELISA试剂盒如读板时板底不清洗等。应确保酶标板清洗。所以在全部操作过程中确保酶标板不触摸次氯酸；尽也许完成ELISA检查规范自动化，有用进步检查质量。