多克隆抗体具备哪些优势呢
更新时间:2022-02-23 点击次数:922次
多克隆抗体制备的主要流程包括:制备抗原;选择实验动物;动物免疫;试取血进行测试,看看是否成功免疫;如果成功免疫,处死实验动物,采集全部血清;纯化出抗体;鉴定抗体,包括纯度以及特异性。
与单抗制备的区别经过特定抗原处理过的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过细胞融合的方法得到杂交瘤细胞,经HAT培养基筛选、ELISA检测效价后就得到阳性克隆株,Zui后进行细胞培养或将细胞注入到动物腹腔中用腹水培养,收集上清/腹水纯化后就能得到单克隆抗体。而制备多克隆抗体就没有单克隆抗体繁琐,只需将抗原直接注入到动物体内进行免疫,经过3至4次免疫,ELISA测其效价合格后,收集血液离心得到上清,纯化后即能得到多克隆抗体。因此多抗制备的周期就比单抗制备的短,*制备价格也比单抗要低。
多克隆抗体是由免疫的宿主通过不同来源(多克隆)的B细胞分泌产生的抗体。一组多克隆抗体应识别同一抗原,同时由于是多克隆,所以往往对同一抗原的多个不同表位进行识别。
优势:
1、由于多克隆抗体具有多个表位结合位点,可与靶蛋白的多个表位结合,所以,多克隆抗体有助于放大低表达水平的靶蛋白信号,但是,从结果的准确性来说,这个优势也是劣势,它会给定量实验造成不利影响,使结果变得不准确。
2、由于能识别多个表位,多克隆抗体更适用于IP/ChIP实验,可得到更好的结果。
3、制备生产时间短,所需技术和技能要求不高,成本比单克隆抗体低,稳定性强。
4、双抗夹心法ELISA中捕获抗体选择多克隆抗体,可以快速捕获靶蛋白。