抗体反应的主要特点有哪几点
更新时间:2022-04-21 点击次数:871次
抗体指机体的免疫系统在抗原刺激下,由B淋巴细胞或记忆细胞增殖分化成的浆细胞所产生的可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。主要分布在血清中,也分布于组织液及外分泌液中。
抗体具有严密的三维结构,已进化成为在大多数生物环境中,甚至机体大面积创伤时也能保持其活性。抗体紧凑的三维结构使抗体能抵御轻度变性的环境,从而也使抗体的长期存放较为容易。通常需要将甘油或其他稳定剂加到储存的缓冲剂中,以保持实验室中纯化的蛋白活性。
抗体反应是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。这种反应既可在机体内进行,也可以在机体外进行。在机体内,当免疫细胞被抗原激活后,由B细胞分化成熟为浆细胞后所合成、分泌的一类能与相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球蛋白(immunoglobulin,Ig),激活补体系统从而解除抗原对机体的损伤。抗体反应的主要特点有:
1、特异性:特定的抗体只能与特定的抗原(肽段/蛋白)结合,这在WB一抗二抗的种属及反应性的选择常用到;
2、可逆性:结合是非共价结合,在一定条件下这种非共价结合是可逆的;因此,同一NC膜/PVDF膜在Stripping(抗体洗脱)以后可以用来检测其他蛋白;
3、比例性:在整个反应中存在一定的量比关系,只有当二者浓度比例适当时才出现可见反应;WB中蛋白上样量和一抗二抗的稀释比例与此有关,实际操作中抗体的量相对较多,这也是为何抗体可以反复使用的原因之一;
4、阶段性:特异性反应分两阶段,第一阶段反应迅速,第二阶段反应缓慢,两阶段均为特异性结合;WB中抗原抗体结合在室温下,反应1小时结合率可达95%,2小时可达97%以上;4℃在,反应4-6小时可达90%,8小时可达95%(本人忘记了具体的数值,但大致如此)。