本试剂盒采用双抗体夹心法,双抗体夹心原理,是基于要测试的抗原具有二价以上的特性,能识别包被抗体,同时能识别检测抗体,具体过程如下:
(1)将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体,洗涤除去未结合的抗体及杂质,并用无关蛋白封闭空余结合位点。
(2)加受检标本使之与固相抗体接触反应一段时间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。
(3)加生物素标记抗体,使固相免疫复合物上的抗原与生物素标记抗体结合。*洗涤未结合的生物素标记抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。
(4)加辣根过氧化物酶标记亲和素,使生物素标记抗体与辣根过氧化物酶标记的亲和素结合。*洗涤未结合的酶标记物。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。
(5)加入底物显色,即可计算标本浓度。